管花肉苁蓉中苯乙醇苷的研究进展

柳玥雯

摘要：在查阅、收集国内管花肉苁蓉中苯乙醇苷的提取纯化文献基础上，综述近几年管花肉苁蓉中苯乙醇苷的提取、纯化研究进展，旨在为管花肉苁蓉制剂工业化生产研究提供参考。

关键词：肉苁蓉；苯乙醇苷；提取；纯化

DOI：10.3969/J.ISSN.1673—632X.2020.11.011中图分类号：R284.2文献标识码：A

管花肉苁蓉为列当科肉苁蓉属多年生寄生植物，为新疆特有资源，是传统补肾阳的中药材，具有补肾、益精、润燥、通便的功效。现代研究表明，苯乙醇苷类是管花肉苁蓉的主要活性成分和含量最高的化合物，是《中国药典》含量测定的指标成分，具有抗氧化、促进物质代谢、改善学习记忆、增强性功能等作用。苯乙醇苷类化合物包括松果菊苷、毛蕊花糖苷、松果菊苷和麦角甾苷等。

1肉苁蓉中的苯乙醇苷的提取

1.1乙醇回流提取肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物

李蒙等利用响应面法对瓜州肉苁蓉苯乙醇苷的提取工艺进行优化。方法是，以肉苁蓉苯乙醇苷提取率为评价指标，探究乙醇体积分数、提取温度、提取时间、料液比和提取次数对肉苁蓉苯乙醇苷提取率的影响。结果表明，肉苁蓉苯乙醇苷的实际最佳提取工艺条件为乙醇体积分数60%、提取温度80℃、液料比12∶1，提取时间2 h，提取2次，此条件下的提取率为76.5880 mg/g。本研究为瓜州肉苁蓉苯乙醇苷资源开发及工业化生产提供理论依据。

1.2乙醇浸出提取肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物

戴海蓉等优化肉苁蓉提取工艺，为肉苁蓉制剂生产研究提供科学依据。方法是，采用L9（34）正交试验，以提取溶剂、料液比、提取次数为考察因素，出膏率、松果菊苷和毛蕊花糖苷含量为指标，优选肉苁蓉提取工艺。结果显示，肉苁蓉最佳提取工艺为肉苁蓉饮片以8倍量30%乙醇提取2次，每次1 h。

孔征等优化管花肉苁蓉中毛蕊花糖苷的提取工艺，为该药材的深入开发和综合利用提供参考。方法是，采用高效液相色谱法对管花肉苁蓉中的毛蕊花糖苷进行含量测定；色谱柱为Inertsil-ODS-3V，流动相为甲醇-0.2%甲酸水溶液(40∶60，V/V），流速为1 mL/min，柱温为30℃，检测波长为330 nm，进样量为10μL；以毛蕊花糖苷的提取率为考察指标，分别对浸泡时间、乙醇浓度、液料比、提取时间、提取次数进行单因素试验，根据上述试验结果，采用Box-Behnken响应面法对乙醇浓度、液料比、提取时间等条件进行优化，并对优化后的提取工艺进行验证试验。结果显示，毛蕊花糖苷检测质量浓度的线性范围为18.65～932.4μg/mL。最优提取工艺为乙醇浓度63%、液料比8∶1（mL/g）、浸泡2 h、提取时间1.5 h、提取2次。3次平行验证试验所得毛蕊花糖苷的提取率分别为78.21%、76.95%、79.34%，与预测值76.76%的相对误差分别为1.89%、0.25%、3.36%。优化所得管花肉苁蓉中毛蕊花糖苷的提取工艺稳定、可行，适用于该化合物的提取。

1.3甲醇提取肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物

黄翔等选择肉苁蓉最佳提取工艺参数。方法是，采用单因素筛选结合Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果表明，最佳提取工艺是甲醇体积分数55.14%，液料比46.39∶1，提取时间38.50 min。使用该工艺提取肉苁蓉，其5种苯乙醇苷类成分提取完全、充分。

1.4水溶媒提取肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物

刘丽莎等以管花肉苁蓉为原料，探究原料粒径、料液比、浸提温度、时间等因素对苯乙醇苷浸提效果，开发苯乙醇苷水溶媒提取技术。经单因素优化及正交试验优化，管花肉苁蓉苯乙醇苷水溶媒提取最佳工艺为原料粒径大于40目，料液比1∶15，浸提温度80℃，浸提时间2 h，提取率为(175.9±1.1）mg/g，松果菊苷及毛蕊花糖苷分别占总苯乙醇苷的38.85%、8.78%。研究结果为管花肉苁蓉苯乙醇苷提取降低成本及安全生产提供了参考依据。

1.5微波辅助提取肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物

刘洋为优选管花肉苁蓉苯乙醇苷提取最佳工艺并对经分离纯化的苯乙醇苷进行抗氧化活性评价研究，以管花肉苁蓉中的苯乙醇苷得率为检测指标，采用响应面分析法，分别优化乙醇浸提法、超声提取法、微波提取法3种方法的提取效果，选出最优条件，并进行比较；采用DPPH法体外测定苯乙醇苷的抗氧化能力。结果表明，微波辅助提取法在最短时间内具有最高的苯乙醇苷得率，超声波辅助提取法次之，而乙醇浸提法时间最长，得率最低。

蒋媛等筛选管花肉苁蓉中苯乙醇苷的最佳提取工艺。方法是，采用苯乙醇苷得率评分指标，正交设计法筛选。结果表明，管花肉苁蓉中的苯乙醇苷的最佳提取工艺为采用微波辅助提取法，75%的乙醇浓度，提取2次，每次1.5 min，微波功率200 W，料液比1∶20。本试验为管花肉苁蓉中苯乙醇苷的提取提供了参考数据，为管花肉苁蓉的苯乙醇苷类成分提取提供参考书数据，为苯乙醇苷进一步分离及活性研究提供依据。

1.6超声-微波回流提取肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物

丁慧玲等为了使其充分利用，在单因素研究基础上，通过响应面法优化超声-微波回流提取管花肉苁蓉中苯乙醇苷工艺。结果表明，在超声频率40kHz，超声功率为50 W，提取时间15 min时由二次回归模型获得最优工艺条件为提取丙酮体积分数50%，液料比14∶1（mL/g），微波功率100 W，理论得率为49.87%，验证实验得49.2%，与理论值接近。通过红外光谱分析可知，超声-微波提取的是管花肉苁蓉苯乙醇苷类物质。

1.7酶解法提取肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物

高建德等研究复合酶提取肉苁蓉的工艺，比较传统水提、醇提与酶解后水提、醇提，正丁醇萃取物抗氧化活性。方法是，以肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷作为评价指标，选择酶用量、酶解温度、酶解时间为主要因素，通过正交试验确定复合酶提取肉苁蓉的最佳工艺条件，并在此基础上比较不同提取方法下提取物抗氧化活性。结果表明，复合酶强化提取肉苁蓉最佳工艺参数为复合酶0.2%、酶解温度60℃，酶解时间2.5 h；等量药材同体积肉苁蓉提取液，抗氧化活性依次为酶解后醇提＞酶解后水提＞传统醇提＞传统水提。在所得的复合酶提取肉苁蓉工艺条件下，肉苁蓉抗氧化活性可以显著提高。

1.8超声辅助提取肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物

郭雄飞等考察从管花肉苁蓉中提取，纯化苯乙醇总苷类物质的最佳工艺和条件。方法是，通过正交试验优化管花肉苁蓉中苯乙醇总苷的提取工艺，并通过筛选大孔吸附树脂，洗脱液，选择最适树脂和最佳纯化条件。结果表明，苯乙醇总苷的最佳提取工艺为12倍60%乙醇，超声提取3次，每次30 min，提取率95%以上，从8种大孔吸附树脂中选出纯化效果最佳的DM130树脂、最大静态吸附量为344.49 mg/g，用60%乙醇洗脱，解析率达96%，纯度达97%。该方法简单易行，周期短，成本低，所得苯乙醇总苷纯度高，对工业生产具有指导意义.

2纯化工艺

2.1中压柱层析技术纯化苯乙醇苷类

朱玉婷等建立一种快速可靠的肉苁蓉中苯乙醇苷类分离纯化方法。方法是，采用中压柱层析技术进行分离纯化，考察上样浓度、上样体积、洗脱剂体积分数、洗脱流速和收集洗脱液位置等因素，筛选出比较理想的分离纯化工艺。结果表明，确定的最佳工艺为上样浓度100 mg/mL，上样体积100mL，30%甲醇洗脱，洗脱流速为80 mL/min，从目标成分出峰后上升段的1/4处开始收集洗脱液。最终分离得到的松果菊苷、毛蕊花苷含量分别为93.08%、90.20%（=6）。本试验方法简便、准确，能快速制得高质量分数的单体化合物，为其他苯乙醇苷单体化合物的纯化、富集提供技术参考。

2.2大孔树脂技术纯化苯乙醇苷类

刘朋龙等应用AB-8型大孔树脂分离纯化管花肉苁蓉，得到最佳纯化工艺为上样液质量浓度1.2mg/mL，上样流速1.5 BV/h，吸附时间1.5 h，解析时间4 h，洗脱的乙醇体积分数为40%，洗脱流速为1.5 BV/h；收集洗脱液，减压浓缩后冷冻干燥，得到管花肉苁蓉中苯乙醇苷的初步纯化物，其纯度达到80%，纯化前纯度为42.5%，比纯化前增加了37.5%。

王毓杰等优选管花肉苁蓉中苯乙醇苷的纯化工艺。方法考察7种大孔树脂对2种苯乙醇苷的吸附和解吸附性能，确定最佳纯化工艺条件。结果最佳提取纯化工艺为管花肉苁蓉药材加12倍量50%乙醇，70℃温浸2次，温浸时间1 h，过滤，合并滤液，回收溶剂，加水调整为含生药0.2 g/mL的上样溶液，上样量为0.8倍柱体积（BV），大孔树脂柱的径高比为1∶9，先用3 BV的水除杂，再用4 BV的30%乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩至干，即得肉苁蓉苯乙醇苷纯化物，该纯化物中2种苯乙醇苷质量分数75%。优选得到的提取纯化工艺稳定可行，适合工业化生产。

2.3膜分离技术纯化苯乙醇苷类

蒋华彬等研究了膜分离技术在管花肉苁蓉苯乙醇苷及多糖同步分离纯化的应用。以新疆特色资源管花肉苁蓉为原料，采用膜分离技术，将管花肉苁蓉水提液先后经过30 ku超滤膜、400u纳滤膜。得到2种目标产物，一是多糖粗品，多糖得率为57.40%，纯度为51.82%；二是苯乙醇苷粗品，苯乙醇苷得率为66.86%，其中松果菊苷、毛蕊花糖苷、总苯乙醇苷纯度分别为26.54%、3.36%、31.11%。形成了一套采用膜分离技术加工管花肉苁蓉水提液的新工艺体系，此工艺操作简单安全、能耗及成本较低，可实现管花肉苁蓉苯乙醇苷及多糖的低碳、高效同步分离纯化。

3结束语

综上所述，苯乙醇类化合物具有水溶性和吸湿性，易溶于甲醇，可溶于丙酮，性质较为稳定。其提取工艺有加热回流提取、乙醇浸出提取、水溶媒提取、甲醇提取、微波辅助提取、超声辅助提取、微波-超声辅助提取、酶解提取等。纯化方法有中压柱层析技术、大孔树脂技术和膜分离技术等。

参考文献

[1]孔征,毛乐静,霍仕霞,等.Box-Behnken响应面法优化管花肉苁蓉中毛蕊花糖苷的提取工艺研究[J].中国药房,2019,30(14):1970-1974.

[2]黄翔,郭晔红,贾存勤,等.肉苁蓉提取工艺及干燥方式研究[J].中草药,2019,50(15):3622-3630.

[3]朱玉婷,李茂星,王建,等.中压柱层析快速分离纯化肉苁蓉提取物中的松果菊苷和毛蕊花苷[J].解放军药学学报,2018,34(06):491-493.

[4]刘朋龙,王亮.应用大孔树脂分离纯化管花肉苁蓉中苯乙醇苷研究[J].农产品加工,2018(23):11-14.

[5]蒋华彬,刘丽莎,张清,等.膜分离技术同步分离纯化管花肉苁蓉苯乙醇苷及多糖[J].食品科技,2019,44(07):229-234.

（作者简介：柳月雯——女，1983年ft生，本溪市化学工业学校，主要从事食品、药品、化学品及农产品的分析检验及方法研究）