肉苁蓉[Cistanche deserticola(Y.C.Ma.)]多寄生于红柳、白刺、梭梭的根部,是我国名贵中药,被誉为“沙漠人参”[2]。肉苁蓉多糖为肉苁蓉的主要生物功能活性成分之一,但是对于肉苁蓉多糖是否有清除自由基的作用未见报道。本文采用光谱分析的方法,测定了肉苁蓉多糖对超氧阴离子自由基、羟自由基、DPP H·自由基、单线态氧4种自由基的清除作用,从而对其抗氧化活性做出评价,为充分开发利用这一天然资源提供科学依据。

新疆肉苁蓉多糖的提取方法

取30g肉苁蓉粉末,置于500m L锥形瓶中,分别用石油醚(60—90℃)、乙醚和体积分数80%乙醇热溶液(30℃)浸泡6h,残渣挥干溶剂。在滤渣中按固液比1∶10加水浸泡24h,加热30℃提取100min,提取结束后,离心获得上清液。上清液经减压浓缩后加入3倍体积的95%乙醇沉淀,4℃下静置24h,离心后收集沉淀,真空干燥即可获得肉苁蓉粗多糖。称取1.00g粗多糖,用水溶解并定容于50m L容量瓶中,待测备用。

新疆肉苁蓉多糖对O2·清除效果

O2·的化学性质活泼,能使生物膜上的脂肪酸产生过氧化物,进而破坏细胞[6]。本文采用多巴胺法测定O-·的清除能力,肉苁蓉对O-·清除能力见图1。结果表明:肉苁蓉多糖可以抑制多巴胺自氧化产生的O-·,并且在测定的浓度范围内(0—8mg/m L),随着浓度的增大而递增,但清除能力低于抗坏血酸。

新疆肉苁蓉多糖·OH的清除效果

·OH是活性氧中最活泼的氧自由基之一,它几乎能与活细胞中任何生物大分子发生反应,可导致机体组织脂质过氧化,蛋白质聚合与解聚,核酸断裂等生化过程,引发组织细胞病变,导致各种疾病的发生和加速机体衰老[7]。肉苁蓉多糖对·OH清除能力见图2。实验结果表明肉苁蓉多糖对·OH有良好的清除作用,且随浓度增大而增大。

新疆肉苁蓉多糖对DPPH·清除能力

DPPH·(二苯代苦味肼基自由基)是一种稳定的自由基,在有机溶剂中呈紫色,在517nm附近有强吸收。加入抗氧剂后,一部分自由基被清除,使吸收减弱,可借此来评价该物质的抗氧化活性[8]。肉苁蓉多糖对DPP H·清除能力见图3。实验结果表明,肉苁蓉多糖对DPPH·的清除能力与其浓度呈正相关,且清除能力大于抗坏血酸。

新疆肉苁蓉多糖对1 O2清除能力

单线态氧是一种激发态的分子氧,化学性质活泼,由于未成对电子具有成对的趋势,故自由基显示出较活泼的化学性质[9]。肉苁蓉多糖对1 O2清除能力见图4。实验结果表明,肉苁蓉多糖在0—4.0mg/m L范围内,清除单线态氧的能力低于抗坏血酸,浓度大于4.0mg/m L时,肉苁蓉多糖清除能力大于抗坏血酸。

通过不同活性氧自由基体系,对肉苁蓉多糖体外抗氧化活性进行了详细研究。从实验结果可以看出,在试验浓度范围内,肉苁蓉多糖提取物对O2·、·O H、DPP H·、O2均有清除作用,对不同的体系,清除作用不尽相同。结果表明肉苁蓉多糖是一种有效的外源性天然抗氧化剂,值得进一步研究开发和综合利用。

参考文献

[1]凌关庭.抗氧化食品与健康[M].北京:化学工业出版社,2004.1—58.

[2]高明,田子玉,蔡红梅等.肉苁蓉多糖的碱提取及其化学分析[J].农产食品科技,2008,2(3):32—34.

[3]石双群,宋新芳.多巴胺的自氧化作用[J].河北师范大学学报,1997,21(4):387—389.

[4]张泽庆,田应娟,张静.防风多糖的抗氧化活性研究[J].中药材,2008,31(2):268—271.

[5]李海平,张树海,张坤生.滑菇多糖抗氧化活性研究[J].食品研究与开发,2008,29(4):56—60.

[6]莫简.医用自由基生物学导论[M].北京:人民卫生出版社,1989.21—25.