管花肉苁蓉的苯乙醇苷类成分

北京医科大学药学院天然药物学系 ( 100083)宋志宏屠鹏飞赵玉英郑俊华

摘要采用各种色谱技术主要为HPL C从国产管花肉苁蓉Cistanche tubulosa ( Schenk) Wigh t 中分离得到7个苯乙醇苷类化合物, 根据理化性质和波谱数据鉴定它们的结构为2′-乙酰基类叶升麻苷(Ⅰ )、类叶升麻苷(Ⅱ )、crenato side(Ⅲ )、丁香苷 A 3′-α-L -吡喃鼠李糖苷 (Ⅳ )、异类叶升麻苷 (Ⅴ )、去咖啡酰基类叶升麻苷 (Ⅵ )和红景天苷(Ⅶ   )。 化合物Ⅲ 为首次从本属植物中分离得到 , 其它化合物为首次从本植物中分离得到。

关键词 列当科 肉苁蓉属 管花肉苁蓉 苯乙醇苷

中药肉苁蓉为列当科肉苁蓉属植物的干燥带鳞叶的肉质茎,是常用中药之一,具有补肾阳、益精血、润肠通便等功效,常用于治疗男子阳痿、女子不孕、腰膝冷痛、血枯便秘等症[1]。我国有肉苁蓉属植物4种1变种,中国药典一九九五年版收载的品种为肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C.M a.,由于药源紧缺,本属其它种也在各地使用[2]。管花肉苁蓉C.tubulosa(Schrenk)Wight主产于我国新疆,资源比较丰富,为目前中花肉苁蓉的主要基源植物[2]。在巴基斯坦、印度等国也有一种管花肉苁蓉C.tubulosa(Schrenk)Hoo k.f.作为药材使用,但它与国产管药肉苁蓉在形态、化学成分及寄主植物上都有较大区别,被认为是不同的种[3,4]。日本学者对巴基斯坦产的管花肉苁蓉进行了深入研究,分离得到了苯乙醇苷、环烯醚萜苷、木脂素苷等成分[5,6]。国内学者对国产管花肉苁蓉进行了初步的化学成分研究,并对其挥发油成分进行了GC-M S分析[7～9]。为了阐明国产管花肉苁蓉的化学成分,为中药肉苁蓉新药源的开发利用提供科学依据,我们对其化学成分进行了研究,采用HPLC法,从95%乙醇提取物的正丁醇萃取部分分离得到了7个苯乙醇苷类化合物,根据理化性质和波谱数据鉴定它们的结构为2′-乙酰基类叶升麻苷(acetylacteoside,Ⅰ)、类叶升麻苷(acteoside,Ⅱ)、crena to si de(Ⅲ)、丁香苷A 3′-α-L-吡喃鼠李糖苷(sy ring alide A 3′-α-L-rhamnopy rano side,Ⅳ)、异类叶升麻苷(isoacteoside,Ⅴ)、去咖啡酰基类叶升麻苷(decaffeo ylacteoside,Ⅵ)和红景天苷(rhodioloside,Ⅶ)(图1)。Ⅲ为首次从本属植物中分离得到,其它化合物为首次从本植物中分离得到。

1仪器和试剂

红外光谱仪:Perkin-Elmer 983型,KBr压片。核磁共振波谱仪:Bruker ARX-400型、Varian UN ITY-500型,TM S或溶媒作内标。质谱仪:KYKY-ZHP-5型,Zab SpecE型。高效液相色谱仪:Waters 600型(600泵,486紫外/可见检测器);Gilson 712型制备型(306泵,118紫外/可见检测器)。HPLC色谱柱:a.Pheno menex Kro masil 5μm C18 10×250 mm;b.Alltech Eco no sil C18 10μm 22 mm×250 m m;c.Phenomenex Prodig y 5μmO DS(3)100•4.6 m m×250 mm。

色谱纯甲醇、乙腈,水为去离子水重蒸后过滤使用。薄层层析硅胶为青岛海洋化工厂产品;反相硅胶(RP-18,100～120目)为北京欧亚新技术公司产品;Sephadex L H-20为Pharmacia产品;D101大孔吸附树脂为天津南开大学化工厂产品;Diaion HP20大孔吸附树脂为日本三菱化工产品;高效薄层板、RP-18F254薄层板均为Merck产品;聚酰胺薄膜为浙江四青生化材料厂产品。

管花肉苁蓉Cistanche tubulosa(Schenk)R.Wigh t的干燥肉质茎购于新疆于田县医药公司,经本文作者屠鹏飞教授鉴定,样品保存于本室。

2提取和分离

管花肉苁蓉生药36.0 kg,粉碎后用95%EtO H回流提取4次,合并滤液减压浓缩后得乙醇浸膏,再以适量的H2 O混悬,依次用P.ether.、EtO Ac和n-BuOH萃取。取n-BuOH萃取物(500 g)进行D101大孔吸附树脂柱层析,H2 O、10%,30%,50%,70%EtO H依次洗脱。

50%Et O H部分(10.0 g)经反相硅胶柱层析(30%→85%M eO H梯度洗脱)、Sephadex LH-20柱层析(40%→70%MeO H梯度洗脱)得12个流份(Fr.1～12),其中Fr.8～9(0.36 g)经HPLC分离(C18柱b,H2 O-M eOH-CH3 CN=62∶29∶9,8.0m L/min,330 nm)得化合物Ⅰ(21 mg)、Ⅱ(39 mg)、Ⅲ(13 mg)和Ⅳ(28 mg);Fr.10(0.38 g)经HPLC分离(C18柱b,45%MeO H,8.0 m L/min,330 nm)得化合物Ⅴ(170 mg)。H2 O部分(140.0 g)经Diaion HP20大孔吸附树脂柱层析(H2 O→MeO H梯度洗脱)得7个流份(Fr.Ⅰ～Ⅶ)。Fr.Ⅳ(3.2 g)经Sephadex LH-20柱层析(H2 O→30%M eOH梯度洗脱、反相硅胶柱层析〔H2 O→50%MeO H(含0.25%HCOO H)梯度洗脱〕得9个流份,其中流份5和6(0.13 g)经HPLC分离(C18柱a,H2O-MeO H-HCOOH=85∶15∶0.5,2.5 mL/min,280 nm)得化合物Ⅵ(17 mg)和Ⅶ(12 mg)。

3结构鉴定

化合物Ⅰ:淡黄色粉末,UV365下显蓝色荧光,FeCl3-K3[Fe(CN)6]显蓝色。IR,1 HNM R,FABM S数据与文献[5]报道的2′-乙酰基类叶升麻苷基本一致,因此确定Ⅰ为2′-乙酰基类叶升麻苷。

化合物Ⅱ:淡黄色粉末,UV365下显蓝色荧光,FeCl3-K3[Fe(CN)6]显蓝色。IR,1 HNM R,FABM S数据与文献[5]报道的类叶升麻苷基本一致,因此确定Ⅱ为类叶升麻苷。

化合物Ⅲ:淡黄色粉末,UV365下显蓝色荧光,FeCl3-K3[Fe(CN)6]显蓝色。IR(KBr)cm-1:3 394(羟基),2 928,1 694和1 630(α,β-不饱和酯),1 600和1 515(苯环)。1 HNM R(500 M Hz,CD3OD)δ:1.16(3H,d,6.5,R-C H3),4.03(1H,dd,12.0,3.0,A-H-α),4.18(1H,t,9.5,G-H-3),4.59(1H,d,8.0,G-H-1),4.64(1H,dd,10.5,3.0,A-H-β),5.14(1H,t,9.5,G-H-4),5.21(1H,d,1.5,R-H-1),6.32(1H,d,16.0,E-H-α),6.73(1H,dd,8.0,2.0,A-H-6),6.77(1H,d,8.0,A-H-5),6.82(1H,d,8.0,E-H-5),6.87(1H,d,2.0,A-H-2),7.00(1H,dd,8.0,2.0,E-H-6),7.10(1H,d,2.0,E-H-2),7.65(1 H,d,16.0,E-H-β)。13 CNM R数据见表1。FABM S(posit.)m/z:663(M+H)+,477(M+H-Rha)+,325(M+H-Rha-Aglyco ne)+。分子式为C29 H34 O15。以上数据与文献[10]报道的crena toside基本一致。这是首次从本属植物中得到苷元β位O H与Glc 2位O H形成醚键的苯乙醇苷类化合物。

化合物Ⅳ:淡黄色粉末,UV365下显蓝色荧光,FeCl3-K3[Fe(CN)6]显蓝色。IR(KBr)cm-1:3 434(羟基),2 939,1 692和1 628(α,β-不饱和酯),1 609和1 519(苯环)。1 HNM R(500 M Hz,CD3OD)δ:1.13(3H,d,6.5,R-CH3),2.89(2H,m,A-H-β),3.75(1H,m,A-H-α),4.10(1H,m,A-H-α),4.42(1 H,d,8.0,G-H-1),4.96(1H,t,9.0,G-H-4),5.23(1 H,d,1.5,R-H-1),6.32(1H,d,16.0,E-H-α),6.74(2H,d,8.5,A-H-3,5),6.82(1H,d,8.0,E-H-5),7.00(1H,dd,8.0,2.0,E-H-6),7.09(1H,d,2.0,E-H-2),7.11(2H,d,8.5,A-H-2,6),7.63(1H,d,16.0,E-H-β)。13 CNM R数据见表1。FABM S(posit.)m/z:631(M+Na)+,609(M+H)+,471(M+H-Ag lycone)+,463(M+H-Rha)+,325(M+H-Ag lycone-Rha)+。分子式为C29 H36 O14。以上数据与文献[6]报道的丁香苷A 3′-α-L-吡喃鼠李糖苷基本一致。